Cd4 клетки при рассеянном склерозе
Данные о субпопуляциях лимфоцитов в крови и ликворе больных РС достаточно противоречивы.
Нарушение иммунорегуляции при РС проявляется также при исследовании неспецифической супрессорной активности. Получены данные о снижении супрессорной активности клеток, стимулированных Кон-А при обострении РС с возвращением до контрольных показателей при выходе из обострения (Balashov K.E., Weiner H.L., 1994; Balashov K.E. et al., 1995).
Недостаточность супрессорных систем проявляется и в снижении способности Т-клеток больных РС контролировать продукцию Ig всех классов В-клетками in vitro, особенно при активном РС (Oger J. et al., 1986). Повышение продукции иммуноглобулинов клеточными структурами больных РС можно расценивать как проявление активации В-клеток in vivo; последствиями такой активации могут быть олигоклональные Ig и наличие свободных легких цепей Ig в ликворе больных (Тотолян Н.А. и др., 1991; Тотолян Н.А., 1993). Выявление олигоклональных групп IgG в ликворе не является специфичным для РС тестом. Эти IgG могут быть выявлены у больных с различными воспалительными заболеваниями мозга, неврологическими проявлениями СПИДа и другими заболеваниями. В то же время, около 5% больных с клинически достоверным РС могут не иметь олигоклональные группы IgG в ликворе (Zemen A. et al, 1996), а специфичность олигоклональных Ig может меняться по мере развития заболевания. Повышенное содержание легких цепей Ig каппа-типа имеют от 80 до 95% больных РС. В диагностически сложных ситуациях при нарушенной проницаемости гемато-энцефалического барьера более информативен расчет индекса легких цепей. Этот тест позволяет подтвердить диагноз РС в 95% случаев, а на стадии ранних клинических проявлений (1-3 месяца) -–в 85% случаев (Sindick C., Laterre E.,1991; Тотолян Н.А., 1998).
В лаборатории нейроиммунологии Института мозга человека РАН проводится подробное изучение иммунологического статуса у пациентов с ремиттирующей формой рассеянного склероза в разные периоды течения заболевания (И.Д.Столяров и др., 1998). Мы придерживаемся следующего определения периодов заболевания (Е.И.Гусев и др., 1997):
? обострение – появление нового симптома или группы симптомов или отчетливое ухудшение уже имевшихся симптомов после того, как неврологическое состояние больного было стабильным или улучшалось на протяжении не менее месяца;
? ремиссия – отчетливое улучшение состояния больного в виде уменьшения выраженности или исчезновения симптома и/или симптомов, которое должно длиться не менее 24 часов (при длительности ремиссии более 1 месяца она может определяться как стойкая);
? стабилизация – отсутствие обострений, ремиссий или хронического прогрессирования на протяжении по крайней мере 1 месяца.
В период обострения заболевания обнаруживается незначительное снижение зрелых Т-лимфоцитов (CD3+), преимущественно за счет субпопуляции супрессорных/цитотоксических клеток (CD8+) (таблица 11), а также повышение пролиферативной и функциональной активности клеток в ответ на митогены.
В период ремиссии при нормализации количества CD3+ лимфоцитов значительно повышается уровень CD8+ субпопуляции лимфоцитов по сравнению с показателями в контрольной группе. Следствием дисбаланса регуляторных субпопуляций является снижение иммунорегуляторного индекса (отношение CD4+ к CD8+), свидетельствующее о нарушении дифференцировки иммуноцитов. При исследовании функциональных показателей обнаружено угнетение ответа лимфоцитов на митоген лаконоса (PW) на 42% и снижение спонтанного включения 3Н+-тимидина на 57% в сравнении с соответствующими показателями у доноров. Угнетение пролиферативного ответа сопровождалось повышением супрессорной активности лимфоцитов: спонтанная супрессорная активность составила 312% от нормы, Кон-А-индуцированная – 243% от нормы. Фагоцитарная активность нейтрофилов в НСТ-тесте имела следующие особенности: наблюдалось снижение резервного коэффициента на 40% по сравнению с донорами, в основном за счет повышения уровня базального НСТ, который составил 321% от нормы. Обнаружена дисиммуноглобулинемия: содержание IgA было снижено до 43%, IgM повышено до 172% от нормы. Отмечено снижение цитотоксической активности ЕК.
Субпопуляция CD22+ лимфоцитов, отражающая состояние гуморального иммунитета, претерпевала незначительные изменения, не выходя за границы нормальных значений во все периоды заболевания.
Реконституция иммунной системы завершается в период стабилизации заболевания, когда все показатели приобретают нормальные значения, достоверно не отличающиеся от значений в контрольных группах. Это касается и уровня сенсибилизации лимфоцитов к мозгоспецифическим антигенам (основному белку миелина – ОБМ, антигену нейрональных мембран, галактоцереброзидам-С 1 типа, белку S-100) в реакции торможения адгезии лейкоцитов (РТАЛ) (см. таблицу 2). В периоды обострения и ремиссии сохраняется гиперчувствительность лимфоидных клеток к этим антигенам, особенно выраженная к ОБМ, а в период стабилизации происходит нормализация данных показателей.
Уровень субпопуляций Т- и В-лимфоцитов у больных РС в разные периоды заболевания
Примечание: * - достоверное различие при сравнении результатов пациентов с РС и доноров при р ? 0,01.
Сенсибилизация лимфоцитов к нейроспецифическим антигенам у больных РС в разные периоды заболевания
Примечания: 1) Индекс адгезии выражается в условных единицах.
2) *- достоверное различие при сравнении результатов пациентов с РС и доноров при р ? 0,01.
Предполагается, что характер сенсибилизации зависит от наличия и распространенности демиелинизирующего процесса. Выраженная сенсибилизация к белку S-100, вероятно, связана с повреждением как нейронов, так и клеток глии, и свидетельствует о развертывании реакции гиперчувствительности к специфическим мозговым антигенам. Аутоиммунная реакция сопровождается разрушением оболочек аксона и глиальных клеток, продуцирующих миелин, что подтверждается выявлением гиперчувствительности лимфоцитов к основному белку миелина. Обнаружение гиперчувствительности к антигену нейрональных мембран фиксирует повреждение мембран нейронов, что не может быть выявлено и описано при МРТ, но сопровождается выраженными клиническими паттернами.
Сенсибилизация к галактоцереброзидному антигену регистрировалась в 60% случаев, что может свидетельствовать о высокой степени вовлечения в патологический процесс наружных мембран миелина и олигодендроцитов, на которых локализуются галактоцереброзиды. Подтверждением этому может служить обнаружение в сыворотке крови у большинства больных РС аутоантител к галактоцереброзидам.
Интерфероновый статус также претерпевает значительные изменения в различные периоды заболевания. Исследование показателей интерферонового статуса позволяет судить об иммунореактивности организма in situ. Например, повышение титров сывороточного ИФН может свидетельствовать об острой стадии заболевания, а нормализация показателей ИФН-статуса обычно совпадает с процессами выздоровления. Также обнаружена прямая связь между показателями ИФН-гамма и тяжестью заболевания и обратная связь с количеством ИФН-альфа.
В период обострения нами было обнаружено значительное повышение сывороточного интерферона, снижение альфа-интерферона и повышение (в сравнении с показателями в другие периоды заболевания) гамма-интерферона. В дальнейшем, при относительной ригидности напряженности уровня сывороточного интерферона определялось значительное уменьшение степени индукции гамма-интерферона (таблица 13).
Показатели интерферонового статуса у больных РС в разные периоды заболевания
Примечание: * - достоверное различие при сравнении результатов пациентов с РС и доноров при р ? 0,01.
Проанализировав результаты нейроиммунологического тестирования, мы выделили несколько основных показателей иммунного статуса, на которые рекомендуем ориентироваться при назначении пациентам иммунокорригирующих препаратов:
• содержание супрессорных/цитотоксических лимфоцитов,
• значение соотношения CD4 +/ CD8 +,
• уровень чувствительности иммуноцитов к основному белку миелина,
• уровень продукции интерферона-гамма.
Подчеркнем, что изменение показателей клеточного и гуморального иммунитета указывает на необходимость иммунологического мониторинга и иммунотерапии и в стадии ремиссии и стабилизации заболевания.
В последнее время в литературе обсуждается значение нарушения соотношения Т-хелперов первого (Тх1) и второго типов (Тх2), и нарушения баланса про- и противовоспалительных цитокинов в патогенезе рассеянного склероза. Большое внимание уделяется повышению активности Тх1-лимфоцитов и моноцитов и продукции иммунокомпетентными клетками провоспалительных цитокинов ИЛ-1, ИЛ-6, ИЛ-12, ФНО-альфа и ИФН-гамма. Nicoletti F., Patti F., Coeuzza C. et al. (1996) считают важным в патогенезе РС повышение активности Тх1-лимфоцитов и выработки ими таких провоспалительных цитокинов, как ИЛ-2, ФНО-альфа, ИФН-гамма, ИЛ-12. По мнению этих же авторов, ИЛ-12-индуцированный Тх1-обусловленный иммунный ответ вызывает демиелинизацию и повреждение олигодендроцитов.
В патогенезе РС важное место занимает нарушение цитокиновой регуляции как интратекальных, так и периферических механизмов иммунного ответа. В частности, в образцах мозга больных РС обнаружены отсутствующие в норме или при других неврологических заболеваниях невоспалительного характера клеточно-ассоциированные формы ФНО-альфа и ИЛ-1 (Hofman F.M., Hanwehr R.I., Dinarello C.A. et al.,1986; Hofman F.M., Hinton D.R., Johnson K., Merrill J.E.,1989).
Продукция ИЛ-1 была зарегистрирована в большинстве очагов и в гистологически неизмененной паренхиме мозга больных РС, но наиболее активная продукция этого цитокина отмечена именно в активных очагах (Canella B., Raine C.S., 1995). Гистохимические исследования показали, что в мозге больных РС ИЛ-1 появляется преимущественно на макрофагах в центре очагов и на микроглии (Brosnan C.F. et al., 1995).
При РС не выявляется отчетливого повышения содержания ИЛ-1 в сыворотке и ликворе, но наблюдается повышение спонтанной и митогенстимулированной продукции ИЛ-1 клетками крови и ликвора, чаще при активном течении заболевания (Imamura K. et al., 1993; Maimone D. et al., 1993; Matsuda M. et al., 1991; Оганезов В.К. и др.,1992).
В большинстве исследований отмечено повышение содержание ИЛ-6 в ликворе больных РС (Araga S. et al., 1991; Maimore D. et al., 1991; 1993). Культуры клеток крови больных РС вырабатывают повышенное количество этого цитокина (Imamura K. et al., 1993; Maimone D. et al., 1993; Navikas V. et al., 1996). Продукция этого цитокина клетками больных РС еще больше повышалась после стимуляции клеток антигенами мозга, что не наблюдалось при использовании клеток от больных с другими неврологическими заболеваниями (Navikas V. Et al., 1996). Механизмы участия ИЛ-6 в патогенезе РС могут быть связаны с характерной для этого заболевания признаками поликлональной активации В-системы иммунитета. ИЛ-6 влияет на дифференцировку нейронов, усиливает продукцию фактора роста нервов и ремиелинизацию (Satoh T. et al., 1988).
При активном РС происходит повышение продукции ИЛ-6 и ИЛ-1 (Оганезов В.К., 1992), что является признаком активации моноцитов и может приводить к повышению продукции патогенных антител. В то же время, активация гуморального иммунитета под влиянием ИЛ-6 может сопровождаться подавлением активности клеточных реакций, что при РС является благоприятным эффектом. Так как ИЛ-6 может снижать продукцию ИЛ-1 и ФНО-альфа (Schindler et al., 1990), повышать продукцию ингибиторов ИЛ-1 (Tilg H. Et al., 1994) и стимулировать регенерацию (Satoh T. еt al., 1988), то повышение его продукции может иметь противовоспалительный и компенсаторный характер.
Как уже отмечалось, ФНО-альфа является цитотоксичным для олигодендроцитов и может оказывать непосредственное повреждающее действие на миелин (Warren J.S., 1990).
Продукция ФНО-альфа в ткани мозга характерна для РС и достигает максимума в хронических очагах с реактивацией процесса по краям. Макрофаги в центре очагов и микроглия в гистологически неизмененной паренхиме также способны вырабатывать ФНО-альфа (Brosnan C.F. et al., 1995). Исследования продукции ФНО-альфа культурами клеток крови выявили более высокие уровни продукции у больных РС по сравнению с контролями (Beck J. Et al., 1988; Merill J.E. et al., 1989; Imamura K. et al., 1993). Было установлено достоверное повышение продукции ФНО-альфа у больных РС в активную стадию ремиттирующего или первично-прогрессирующего течения заболевания по сравнению с контрольными показателями или данными при стабилизации заболевания (Chofflon M. et al., 1992, Rieckman F. Et al., 1994). Клоны клеток из ликвора больных РС также продуцируют повышенное количество ФНО-альфа (Benvenuto R. Et al., 1994). Гусев Е.И., Пинегин Б.В. и др. (1991) предложили считать повышение продукции ФНО-альфа предвестником активизации иммунопатологического процесса при РС. Максимальное повышение продукции этого цитокина наблюдается за 5-14 дней до клинического обострения заболевания, снижаясь в подострую стадию. Это было подтверждено последующими исследованиями, показавшими, что повышение продукции ФНО-альфа клетками крови больных РС может быть одним из наиболее точных маркеров активации патологического процесса при РС (Rieckmann P. Et al., 1994; Navikas V. et al., 1996).
В лаборатории нейроиммунологии Института мозга человека РАН были исследованы уровни спонтанной и митоген-индуцированной продукции ИЛ-1бета, ИЛ-6 и ФНО-альфа (иммуноферментный анализ, тест-системы “Immunotech”, Франция). Группу сравнения (контрольную) составили больные другими невоспалительными неврологическими заболеваниями.
В группе больных с обострением РС было выявлено повышение спонтанной и индуцированной продукции ИЛ-1бета, которая составила соответственно 238 и 232%; ИЛ-6 – до 331 и 207%, а также повышение уровня продукции ФНО-альфа: спонтанной до 518, и индуцированной - до 396% от соответствующих показателей в группе сравнения.
В стадию ремиссии обнаружено снижение спонтанной продукции ИЛ-1? до 72% от показателей в группе сравнения. Уровень стимулированной продукции составил 150%. Наблюдалось незначительное повышение спонтанной и индуцированной продукции ИЛ-6 – до 140 и 130% соответственно от уровня в контрольной группе. Как и в период обострения, отмечалось усиление спонтанной и стимулированной продукции ФНО-?, который составил 280 и 390% от соответствующих показателей в группе сравнения.
Результаты исследования свидетельствуют, что показатели спонтанной продукции цитокинов имеют более выраженные различия в зависимости от стадии заболевания, в отличие от соответствующих показателей при ответе на индуктор, что особенно проявляется при сопоставлении уровней ИЛ-1? и ИЛ-6, и, в меньшей степени, ФНО-?. Эти данные подтверждают наличие аномалий в цитокиновой сети при рассеянном склерозе, свидетельствующие об усилении продукции провоспалительных цитокинов, особенно в период обострения заболевания. Исследование цитокинового профиля позволяет уточнить стадию патологического процесса и оптимизировать коррекцию иммунологических нарушений.
Согласно литературным и собственным данным, изменения иммунологического статуса у пациентов с PC находятся в зависимости от стадии заболевания, характера его течения и проводимой терапии. Специалисты Российского Государственного Медицинского Университета (проф. Демина Т.Л. и др., Москва, 1998) по данным собственных исследований делают следующие выводы: 1) клинические и иммунологические изменения взаимосвязаны, но иммунологические изменения опережают клинические; 2) ряд изменений в иммунной системе являются адаптационными и не нуждаются в коррекции; 3) для PC характерна большая! вариабельность показателей иммунитета и использование одного или двух иммунологических параметров не позволяет определить стадию активности патологического процесса; 4) изменения иммунологических показателей взаимосвязаны в рамках определенной стадии активности процесса, определить которую можно на основе системного анализа показателей иммунных реакций; 5) смена стадий иммунопатологического процесса при PC происходит согласно определенным закономерностям, но при этом имеются выраженные индивидуальные особенности; 6) центральное место в иммунорегуляции занимает цитокиновый статус, во многом определяющий стадию активности процесса.
Данные о субпопуляциях лимфоцитов в крови и ликворе больных PC достаточно противоречивы. Наиболее часто сообщается о снижении CD8+ лимфоцитов во время обострения PC и за несколько дней до обострения (Reinherz E.L.et al., 1980, Huddlestone J.R., Oldstone В.A.,I 1982; Sandberg-Wolheim M., 1983; Werner H.L. et al., 1984; Craig J.C. et al.,1985). По данным Гусева Е.И. и др. (1992) снижение CD8+ клеток с одновременным повышением содержания клеток с СВ4-рецептором наблюдалось только у больных с тяжелым течением PC. Этими же авторами было отмечено повышение содержания CD4+ клеток в ликворе больных PC.
Нарушение иммунорегуляцпп при PC проявляется также при исследовании неспецифической супрессорной активности. Получены данные о снижении супрессорной активности клеток, стимулированных Кон-А при обострении PC с возвращением до контрольных показателей при выходе из обострения (Balashov K.E., Weiner H.L., 1994; ВаlashovK.E. et al., 1995).
Недостаточность супрессорных систем проявляется и в снижении способности Т-клеток больных PC контролировать продукцию Ig всех классов В-клетками in vitro, особенно при активном PC (Oger J. et al., 1986). Повышение продукции иммуноглобулинов клеточными структурами больных PC можно расценивать как проявление активации В-клеток in vivo; последствиями такой активации могут быть олигоклональные Ig и наличие свободных легких цепей Ig в ликворе больных (Тотолян Н.А. и др., 1991; Тотолян Н.А., 1993). Выявление олигокло-нальных групп IgG в ликворе не является специфичным для PC тестом. Эти IgG могут быть выявлены у больных с различными воспалительными заболеваниями мозга, неврологическими проявлениями СПИДа и другими заболеваниями. В то же время, около 5% больных с клинически достоверным PC могут не иметь олигоклональные группы IgG в ликворе (Zemen A. et al, 1996), а специфичность олигоклональных Ig может меняться по мере развития заболевания. Повышенное содержание легких цепей Ig каппатипа имеют от 80 до 95% больных PC. В диагностически сложных ситуациях при нарушенной проницаемости гемато-энцефалического барьера более информативен расчет индекса легких цепей. Этот тест позволяет подтвердить диагноз PC в 95% случаев, а на стадии ранних клинических проявлений (1-3 месяца) – в 85% случаев (Sindick С Laterre E.,1991; Тотолян Н.А., 1998).
Сорокин A.M. и соавторы (1987), Чекнев С.Б. и соавторы (1990), Гусев И.Е. и соавторы (1992) отмечают снижение цитотоксической активности естественных киллерных (ЕК) клеток у больных PC без четкой зависимости от клинического состояния больных.
В лаборатории нейроиммунологии Института мозга человека РАН проводится подробное изучение иммунологического статуса у пациентов с ремиттирующей формой рассеянного склероза в разные периоды течения заболевания (И.Д.Столяров и др., 1998). Мы придерживаемся следующего определения периодов заболевания (Е.И.Гусев и др., 1997):
- обострение–появление нового симптома пли группы симптомов или отчетливое ухудшение уже имевшихся симптомов после того, как неврологическое состояние больного было стабильным или улучшалось на протяжении не менее месяца;
- ремиссия – отчетливое улучшение состояния больного в виде уменьшения выраженности или исчезновения симптома и/или симптомов, которое должно длиться не менее 24 часов (при длительности ремиссии более 1 месяца она может определяться как стойкая);
- стабилизация – отсутствие обострений, ремиссий или хронического прогрессирования на протяжении по крайней мере 1 месяца.
В период обострения заболевания обнаруживается незначительное снижение зрелых Т-лимфоцитов (CD3+), преимущественно за счет субпопуляции супрессорных/цитотоксических клеток (CD8+) (таблица 11), а также повышение пролиферативной и функциональной активности клеток в ответ на митогены.
В период ремиссии при нормализации количества CD3+ лимфоцитов значительно повышается уровень CD8+ субпопуляции лимфоцитов по сравнению с показателями в контрольной группе. Следствием дисоаланса регуляторных субпопуляций является снижение иммунорегуляторного индекса (отношение CD4+ к CD8+), свидетельствующее о нарушении! дифференцировки иммуноцитов. При исследовании функциональных показателей обнаружено угнетение ответа лимфоцитов на митоген лаконоса (PW) на 42% и снижение спонтанного включения ЗН+-тимидина на 57% в сравнении с соответствующими показателями у доноров. Угнетение пролиферативного ответа сопровождалось повышением cynpecсорной активности лимфоцитов: спонтанная супрессорная активность составила 312% от нормы, Кон-А-индуцированная – 243% от нормы. Фагоцитарная активность нейтрофилов в НСТ-тесте имела следующие особенности: наблюдалось снижение резервного коэффициента на 40% по сравнению с донорами, в основном за счет повышения уровня базального НСТ, который составил 321% от нормы. Обнаружена дисиммуноглобулинемия: содержание IgA было снижено до 43%, IgM повышено до 172% от нормы. Отмечено снижение цитотоксической активности ЕК.
Субпопуляция CD22+ лимфоцитов, отражающая состояние гуморального иммунитета, претерпевала незначительные изменения, не выходя за границы нормальных значений во все периоды заболевания.
Реконституция иммунной системы завершается в период стабилизации заболевания, когда все показатели приобретают нормальные значения, достоверно не отличающиеся от значений в контрольных группах. Это касается и уровня сенсибилизации лимфоцитов к мозгоспецифическим антигенам (основному белку миелина – ОБМ, антигену нейрональных мембран, галактоцереброзидам-С 1 типа, белку S-100) в реакции торможения адгезии лейкоцитов (РТАЛ) (см. таблицу 2). В периоды обострения и ремиссии сохраняется гиперчувствительность лимфоидных клеток к этим антигенам, особенно выраженная к ОБМ, а в период стабилизации происходит нормализация данных показателей.
Таблица 11
Уровень субнопуляций Т- и В-лимфоцитов у больных PC в разные периоды заболевания (M±m)
| Показатель | Обострение (n=16) | Ремиссия (n =20) | Стабилизация (n =18) | Доноры (n =30) |
|---|---|---|---|---|
| CD3+% | 42,31±2,641 | 53,48+2,77 | 54,78±1,33 | 59,30±2,1 |
| CD4 +% | 30,38±2,341 | 33,30±2,83 | 37,61±1,00 | 39,10+1,9 |
| CDS +% | 11,94+1,171 | 18,9+2,181 | 17,17±0,87 | 19,60±1,8 |
| CD4+/ CD8 + | 2,85+0,31 | 1,42±0,23 | 2,32+0,15 | 1,99±0,09 |
| CD22+% | 15,06±0,44 | 17,85±0,43 | 17,50+0,53 | 18,4±1,6 |
Примечание: * - достоверное различие при сравнении результатов пациентов с PC и доноров при р
Рассеянный склероз поражает лиц молодого возраста. Правильный диагноз устанавливается на 4-5 год после появления первых симптомов. К сожалению, диагностика болезни сложна. Промедление в терапии неблагоприятно сказывается на здоровье пациента. Что необходимо для своевременного выявления болезни и какие анализы указывают на начало процесса? Об этом расскажем далее.
Анализ крови
Лабораторные тесты при РС играют вспомогательную роль. Для диагностики используются методы визуализации. Только наличие очагов Что такое демиелинизация?
Это патология, которая избирательно поражает нервную оболочку центральных или периферических волокон и приводит к потере их функции. Очаги демиелинизации могут появляться в любом отделе нервной системы. Разрушение нерва проходит по двум путям. В первом случае миелин разрушается из-за генетического дефекта (миелинопатия). Во втором оболочка страдает от агрессивных внешних или внутренних воздействий (миелинокластия). К демиелинизирующим поражениям мозга относят рассеянный склероз, синдром Гийена-Барре. При развитии воспаления поражается не только волокно нерва, развивается повреждение эндотелия сосудов и формируется периваскулярный отек.
Метод обследования внутренних органов и тканей с помощью явления ядерного магнитного резонанса.
Поэтому ученые всего мира разрабатывают эффективный анализ для выявления РС на ранних стадиях. Идет поиск маркеров, которые повышаются при аутоиммунном процессе. И уже получены первые результаты. Об этом мы подробно расскажем далее.
Как сдавать?
Кровь берут из пальца или из вены. Первый способ предпочтительнее. Тест проводят натощак. После последнего приема пищи должно пройти не менее 8 часов.
Для чего используется ОАК?
Тест показывает любые изменения в организме. Он неспецифичен. При воспалительном процессе отмечается повышение лейкоцитов, лимфоцитов и СОЭ. У пациентов с РС в период ремиссии анализ не содержит изменений.
Подготовка к исследованию
Специальной подготовки не требуется. Сдавать кровь лучше натощак.
Побочные эффекты
Забор крови из пальца проводится специальным инструментом. Лаборант использует индивидуальные перчатки для каждого пациента. Применяют стерильный скарификатор или ланцет. При соблюдении санитарных норм осложнений не бывает.
| Показатели | Норма | При РС |
| Лейкоциты | 4-9 на 10 9 | Возможно повышение во время обострений |
| Эритроциты | 3,7-5,1 на 10 12 | Без изменений |
| Тромбоциты | 180-400 на 10 9 | Без изменений |
| Гемоглобин | 120-160 г/л | Без изменений |
| Гематокрит | 34-46% | Без изменений |
| Формула: палочкоядерные | 1-6% | Без изменений |
| Сегментоядерные | 47-72% | Возможно снижение показателей |
| Эозинофилы | 0-5% | Без изменений |
| Базофилы | 0-1% | Без изменений |
| Лимфоциты | 20-40% | Возможно повышение |
| Моноциты | 2-9% | Без изменений |
Как сдавать?
Забор крови проводят из вены. Используется кубитальный сосуд в локтевой ямке. При невозможности проведения анализа здесь, пунктируют любое доступное место (бедренная вена, вены предплечья или кисти).
Для чего используется БАК?
Тест отражает работу и функцию органов. Он неспецифичен при РС. При болезни формируются изменения в соотношении белков крови. Повышаются глобулиновые фракции.
Подготовка к исследованию
Кровь сдают натощак. Нельзя курить перед обследованием. Накануне следует исключить употребление жирной пищи.
Побочные эффекты
Возможны гематомы в месте пункции при нарушении техники забора или повышенной ломкости сосуда. В редких случаях формируются флебиты и тромбофлебиты кубитальных вен.
| Показатели | Норма | При РС |
| Общий белок (фракции) | 65-83 г/л | Возможно повышение во время обострений за счет глобулиновой фракции |
| Билирубин (общий, свободный и связанный) | 3,4-17,1 мкмоль/л 1-7,9 мкмоль/л 1-19 мкмоль/л | Повышение за счет общей и свободной фракции |
| АЛАТ/АСАТ | до 45/до 37 ЕД | Без изменений |
| Мочевина | 2,8-7,2 ммоль/л | Возможно повышение |
| Креатинин | 53-115 мкмоль/л | Возможно повышение |
| ГГТП | До 55 ЕД | Без изменений |
| Щелочная фосфатаза | 30-120 ЕД/л | Без изменений |
| Мочевая кислота | 150-420 мкмоль/л | Без изменений |
| Калий/Натрий | 3,5-5,5/135-145 | Без изменений |
| Хлор | 98-107 | Без изменений |
| СРБ (с-реактивный белок) | 0-5 мг/л | Возможно повышение при обострении |
Рутинное биохимическое обследование не используется для диагностики рассеянного склероза. Изменения в анализах неспецифичны, зависят от возраста больного и наличия сопутствующих заболеваний.
Сейчас активно обсуждают вопросы о роли недостаточности витамина Д в развитии рассеянного склероза. Известно, что жители северных широт чаще страдают от болезни, в то время как пациенты, получавшие добавку вещества, лучше отвечают на лечение. Поэтому при установленном диагнозе рекомендуется пройти тест на кальциферол 25-OH.
Как сдается?
Тест проводят натощак. Сдается кровь из вены. Накануне исключается прием добавок и лекарственных средств с витамином Д.
Почему используется при диагностике?
Найдена корреляция между авитаминозом и прогрессированием симптомов болезни.
Побочные эффекты
Забор крови ведется из вены. После манипуляции возможно появление гематомы, флебита и тромбофлебита кубитального сосуда.
Нормальные европейские показатели общего витамина Д:
- 60 – 100 нг/мл;
- 150-250 нмоль/л.
Нормы российской ассоциации эндокринологов:
| Норма | 30-100 нг/мл |
| Недостаточность | 20-30 нг/мл |
| Дефицит | Менее 20 нг/мл |
Анализ мочи
Тест не имеет диагностического значения. Является показателем работы организма. Входит в протокол обследования при любых заболеваниях.
Как сдается?
В лабораторию анализ доставляют в специальной стерильной таре. Анализ лучше выполнять утром.
Почему используется в диагностике?
Тест показывает функцию мочевыводящей системы. Входит в протокол обследования.
Как сдавать?
Общий анализ мочи сдают утром. Перед сдачей следует приобрести стерильный контейнер. Проводят гигиенические процедуры. В тару доставляют среднюю порцию мочи.
Показатели
При РС не происходит изменений в анализах мочи.
| Цвет | Соломенно-желтый |
| Относительная плотность | 1010-1025 |
| Кислотность | Кислая/слабокислая |
| Белок | Отсутствуют |
| Сахар | Отсутствуют |
| Эпителий | Не более 5 клеток |
| Эритроциты | Не более 1 клетки |
| Лейкоциты | Не более 6 клеток |
| Бактерии | Отсутствуют |
Анализ ликвора
Тестирование спинномозговой жидкости (смж) необходимо проводить на любой стадии заболевания. Иммуноглобулины G появляются в ликворе в ответ на воспаление. В период обострения титр Ig возрастает.
Кроме общего теста смж применяются исследования клональности иммуноглобулинов. При остром воспалении выявляют поликлональный иммунный ответ. Это значит, что формируется много защитных антигенов. При переходе болезни в хроническую фазу уменьшается количество клонов. В цереброспинальном выпоте преобладает олигоклональность Ig.
Как сдается?
Ликвор образуется в желудочках головного мозга. В сутки ее производится 600-700 мл. Она необходима для защиты нервной системы. Спиномозговая жидкость служит для обмена веществ между нейронами и кровью. Образуясь в боковых желудочках, она проходит через третий и четвертый. Из последнего попадает в субарахноидальное пространство и там реабсорбируется обратно в кровь.
В асептических условиях врач выполняет прокол на уровне 3-5 поясничных позвонков. После этого набирают жидкость в пробирку и отправляют ее на исследование. Место инъекции заклеивают асептической повязкой. Пациента просят полежать в течение 2-3 часов.
ФАКТ! Дополнительно берется анализ венозной крови
Почему используется при диагностике?
При рассеянном склерозе иммунитет атакует нервные клетки. В крови практически не обнаруживаются изменения. А вот Ликвор
Ликвор образуется в желудочках головного мозга. В сутки ее производится 600-700 мл. Она необходима для защиты нервной системы. Спиномозговая жидкость служит для обмена веществ между нейронами и кровью. Образуясь в боковых желудочках, она проходит через третий и четвертый. Из последнего попадает в субарахноидальное пространство и там реабсорбируется обратно в кровь.
Как готовится к нему?
Для проведения исследования необходима госпитализация. Она занимает не более суток. После манипуляции не следует вставать некоторое время. Резкая активизация может привести к появлению головных болей. Сейчас применяют специальные иглы, которые способствуют меньшей травматизации твердой оболочки. Пункционная рана быстро заживает.
Побочные эффекты
Самым частым осложнением является кровотечение из поврежденного сосуда. Иногда появляются цефалгии после манипуляции (сильная головная боль), боли в нижних конечностях. При несоблюдении стерильности в центральную нервную систему проникает инфекция. Пункционная игла иногда ломается в мягких тканях.
При верной методике и высокой квалификации врача осложнений не наблюдается. Для подготовки пациенту проводят анестезию или дают легкое успокоительное.
Показатели
Норма и патология при люмбальной пункции:
| Норма | При рассеянном склерозе | |
| Цвет | Бесцветная | Без динамики |
| Прозрачность | Прозрачная | Редко изменяется за счет цитоза |
| Давление | 300-400 мм.вод. ст. | Повышено |
| Плотность | 1003-1008 | Увеличено |
| Цитоз | 0-3 в мкл | Увеличен |
| Реакция | 7,35-7,8 | Редко изменяется |
| Белок | 0,22-0,33 г/л | Может увеличиваться |
| Глюкоза | 2,78-3,8 ммоль/л | Значительно не меняется |
| Хлорида | 120 моль/л | Не меняется |
Диагностическое значение имеют клоны иммуноглобулинов, фракции белка. Определяются при изоэлектрофокусировании и иммуноферментном анализе.
Показатели
| Тип синтеза | Характер определения IG в ликворе | Трактовка |
| 1 | Поликлональный | Острое воспалительное заболевание |
| 2 | Олигоклональный (поликлональный в сыворотке крови) | 85-90% дебют РС |
| 3 | Олигоклональный (олигоклональный в крови) | Появляется при РС, системной красной волчанке, энцефалитах и саркоидозе. |
Анти-МАГ
Исследование антител к гликолипидам миелина и сульфатиду в сыворотке крови имеет диагностическое значение. Их титр определяется в группе пациентов с вторичнопрогредиентным течением. Для диагностики применяется иммуноферментный анализ. При проведении терапии уровень анти-МАГ должен падать.
Как сдается?
Для исследования применяется кровь и цереброспинальная жидкость.
Почему используется при диагностике?
Ученые выявляют связь между активностью некоторых форм и успешности терапии.
Другие анализы
Комплексный тест диагностики РС (олигоклональный IgG и каппа/лямбда легкие цепи иммуноглобулинов в ликворе) позволяет дополнить диагностику.
Как сдается?
Для исследования берут ликвор в условиях стационара.
Почему используется при диагностике?
Необходим для точного диагноза, контроля за лечением и предотвращением обострений.
Как готовится к нему?
Подготовка как к люмбальной пункции.
НОРМАЛЬНЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ
Каппа и лямбда легкие цепи являются маркером интратекального воспаления. В норме они отсутствуют.
Цены и клиники
| Клиники | Проводимые анализы | Цены |
| Санкт-Петербург Государственный медицинский университет им. Павлова | Олигоклональный иммуноглобулин G в ликворе и крови | 2950 руб |
| Научный центр неврологии (Москва) | Олигоклональный иммуноглобулин G в ликворе и крови | Около 3000 рублей |
| ГКБ №31 (Санкт-Петербург) Городской центр по лечению РС | Олигоклональный иммуноглобулин G в ликворе и крови | Диагностика проводится на внебюджетной и бюджетной основе |
| Юсуповская больница (Москва) | Олигоклональный иммуноглобулин G в ликворе и крови | Диагностика проводится на внебюджетной и бюджетной основе |
| Инвитро (филиалы в крупных городах России) | Олигоклональный иммуноглобулин G в ликворе и крови Комплексный тест диагностики РС (олигоклональный IgG и каппа/лямбда легкие цепи иммуноглобулинов в ликворе) | 4600 рублей Готовится в течение 12 рабочих дней |
| Анализ крови на рассеянный склероз в Гемотест (филиалы в крупных городах России) | Свободные лямбда-цепи иммуноглобулинов в спинномозговой жидкости Выявление олигоклонального иммуноглобулина IgG в цереброспинальной жидкости и сыворотке крови Свободные каппа-цепи иммуноглобулинов в спинномозговой жидкости | 5230 рублей Готовится в течение 12 рабочих дней |
Рассеянный склероз довольно сложно диагностировать. Необходимы данные МРТ и трудоемкие тесты. Но чем раньше будет подтверждено заболевание, тем раньше врачи назначают терапию. Именно благодаря ей новые обострения РС появляются все реже даже у пациентов с тяжелыми формами.
Читайте также:
