Приготовление нервно мышечного препарата из лягушки

МЕТОДИЧЕСКИЕ РАЗРАБОТКИ ДЛЯ ВЫПОЛНЕНИЯ ЛАБОРАТОРНЫХ РАБОТ ПО ФИЗИОЛОГИИ ЖИВОТНЫХ

ПРЕДИСЛОВИЕ

Изучение физиологии животных предполагает усвоение студентами как теоретических знаний, так и овладение навыками экспериментальной работы. Первые приобретаются в ходе лекций и самостоятельной работы с учебным материалом, вторые – на лабораторных занятиях.

Лабораторное занятие предусматривает самостоятельное выполнение студентами экспериментов и интерпретацию получаемых данных. В результате выполнения экспериментов студенты знакомятся с методиками измерения физиологических величин, в том числе и с теми, которые применяются в спортивной и клинической практике. Анализ итоговых фактических материалов позволит студентам приобретать навыки научного мышления, рационального представления и корректной интерпретации данных.

В настоящем учебном пособии приведены подробные описания экспериментов (по всем разделам физиологии человека и животных), которые студенты выполняют во время лабораторных занятий. Постановка опытов описана в форме инструкций, последовательно излагающих этапы их проведения. В конце каждой работы студенту предлагается сделать вывод, что способствует более успешному усвоению материала.

К каждому разделу предлагаются контрольные вопросы, задачи, тестовые задания, которые облегчают самостоятельную подготовку обучающихся и контроль усвоения материала, а также дополнительный блок информации.

Лабораторные опыты адаптированы к программе факультета биологии и биотехнологии по физиологии человека и животных. Включены как классические, так и новые лабораторные опыты.

Основная и дополнительная литература содержит последние издания по всем разделам курса и помогает получить более полные знания по всем вопросам, решаемым в ходе занятий.

Учебное пособие предназначено для студентов специальностей биология, биотехнология, экология. Оно может быть использовано также в системах послевузовского образования и повышения квалификации преподавателей.

РАЗДЕЛ 1. ФИЗИОЛОГИЯ ВОЗБУДИМЫХ ТКАНЕЙ

Отличительной особенностью высокоспециализированных тканей является способность реагировать на раздражение сложным комплексом физико-химических реакций, называемых возбуждением. Процесс возбуждения связан с наличием в мембране электрически (для Са 2+ и Сl - ) и химически (для Na + и K + ) управляемых каналов, которые могут открываться в ответ на соответствующее раздражение клетки.

Статическая поляризация – наличие разности потенциалов между наружной и внутренней поверхностями клеточной мембраны. В состоянии покоя поверхность клетки всегда электроположительна по отношению к цитоплазме, т.е. поляризована. Эта разность потенциалов, равная

60 мВ, называется потенциалом покоя , или мембранным потенциалом (МП). К факторам, обусловливающим его существование, относятся:

а) наличие К + -Na + трансмембранных градиентов концентрации и градиентов Cl - и Са 2+ ;

б) высокая избирательная проницаемость мембраны для К + , связанная с наличием в ней постоянно открытых в состоянии покоя калиевых каналов. В то же время проницаемость мембраны для Na + в состоянии покоя незначительна. В связи с этим постоянный поток К + из цитоплазмы создает относительный дефицит положительных зарядов на внутренней поверхности и избыток их на наружной поверхности клетки. Токи, регистрируемые в состоянии статической поляризации, называются токами покоя, или калиевыми токами;

Необходимо отметить, что деполяризация может быть как вызванной (при наличии внешнего стимула), так и спонтанной, обусловленной способностью некоторых видов клеток самовозбуждаться. Причиной такого самовозбуждения являются метаболические обменные процессы в самих клетках.

Реполяризация – восстановление исходного уровня МП. Главными факторами, вызывающими реполяризацию мембраны и способствующими восстановлению исходных Na + -К + -градиентов концентрации, являются процессы активного ионного транспорта. Электрографическим проявлением реполяризации является отрицательный следовой потенциал.

Гиперполяризация – увеличение уровня МП. Вслед за восстановлением исходного значения МП (реполяризация) происходит его кратковременное увеличение по сравнению с уровнем покоя, обусловленное повышением проницаемости калиевых каналов и каналов для Cl - . В связи с этим поверхность мембраны приобретает избыточный по сравнению с нормой положительный заряд, а уровень МП становится несколько выше исходного. Электрографическим проявлением гиперполяризации является положительный следовой потенциал. На этом заканчивается одиночный цикл возбуждения.

Изменение возбудимости в различные фазы одиночного цикла возбуждения. Если принять уровень возбудимости в условиях физиологического покоя за норму, то в ходе развития одиночного цикла возбуждения можно наблюдать ее циклические колебания. Так, в период развития начальной деполяризации на очень короткое время возбудимость незначительно повышается по сравнению с исходной. Во время развития полной деполяризации и инверсии заряда возбудимость падает до 0. Время, в течение которого отсутствует возбудимость, называется периодом абсолютной рефрактерности. В это время даже очень сильный раздражитель не может вызвать возбуждение ткани.

Рис.1 Изменения мембранного потенциала и потенциал действия Вертикальная стрелка в нижней части рисунка — момент появления раздражающего стимула, на отметке –80 мВ — исходный уровень МП.

Рис.2 Мембранный потенциал и потенциал действия. На отметке –70 мВ — исходный уровень МП; значение порога показано стрелкой в левой части рисунка, приведены записи подпороговых изменений МП

Изменение возбудимости в различные фазы одиночного цикла возбуждения. Если принять уровень возбудимости в условиях физиологического покоя за норму, то в ходе развития одиночного цикла возбуждения можно наблюдать ее циклические колебания. Так, в период развития начальной деполяризации на очень короткое время возбудимость незначительно повышается по сравнению с исходной. Во время развития полной деполяризации и инверсии заряда возбудимость падает до 0. Время, в течение которого отсутствует возбудимость, называется периодом абсолютной рефрактерности. В это время даже очень сильный раздражитель не может вызвать возбуждение ткани. Фармакологические вещества, увеличивающие время деполяризации и соответственно период абсолютной рефрактерности ткани, вызывают торможение физиологической деятельности. И наоборот, вещества, уменьшающие время деполяризации, оказывают возбуждающее физиологическое действие.

В фазе восстановления МП возбудимость также начинает восстанавливаться, но она еще ниже исходного уровня. Время восстановления ее от 0 до исходной величины называется периодом первичной относительной рефрактерности. Ткань может ответить возбуждением только на сильные, надпороговые, раздражения.

Вслед за периодом относительной рефрактерности наступает короткий период экзальтации – повышенной (по сравнению с исходной) возбудимости. По времени он соответствует процессу реполяризации.

Заключительный этап одиночного цикла возбуждения – повторное снижение возбудимости ниже исходного уровня (но не до 0), называемое периодом вторичной относительной рефрактерности. Он совпадает с развитием гиперполяризации мембраны. Фармакологические вещества, усиливающие гиперполяризацию мембраны, вызывают ослабление физиологической деятельности (гиперполяризационное торможение). Возбуждение может возникнуть только в том случае, если сила раздражения значительно превысит пороговую. После этого возбудимость восстанавливается, и клетка готова к осуществлению следующего цикла возбуждения.

Вопросы для самоподготовки. 1. Критерии оценки функционального состояния ткани. Определение понятий: возбудимость, порог возбуждения, функциональная лабильность. 2. Основные физиологические состояния биологической мембраны. 3. Электрофизиологическая характеристика статической поляризации. Потенциал покоя. 4 Электрофизиологическая характеристика деполяризации. Потенциал действия. 5. Электрофизиологическая характеристика реполяризации и гиперполяризации. Следовые потенциалы.

РАБОТА 1. Приготовление нервно-мышечного препарата лягушки

Нервно-мышечный препарат является универсальным для исследования функций скелетных мышц и нервов, классическим нервно-мышечным препаратом считают икроножную мышцу и седалищный нерв, который ее иннервирует. Работа выполняется на обездвиженной лягушке.

Способы обездвиживания лягушки. Одним из способов обездвиживания лягушки является наркотизация. В качестве наркотического вещества чаще всего используют эфир. Обездвижить лягушку можно также путем введения в подкожный лимфатический мешок миорелаксантов, которые нарушают передачу возбуждения с нерва на мышцу, в связи с чем возникает расслабление скелетных мышц.

Чаще всего обездвиживание лягушки производят путем разрушения спинного и головного мозга. Разрушение ЦНС производят двумя способами – с сохранением головы и путем декапитации. В обоих случаях лягушку завертывают в марлевую салфетку так, чтобы передние лапки оказались прижатыми к туловищу, а задние находились в вытянутом состоянии. При первом способе обездвиживания лягушку держат в левой руке, указательным пальцем которой сгибают голову лягушки так, чтобы между головой и позвоночником образовался некоторый угол. Препаровальной иглой с небольшим нажимом проводят по средней линии головы сверху вниз пока игла не попадет в небольшую ямку – субокципитальное отверстие. Проколов кожу и мембрану в этом месте, иглу вводят на 1-2 мм в полость черепа и несколькими движениями разрушают головной мозг. Слегка извлекая иглу, направляют ее в позвоночный канал и вращательными движениями разрушают спинной мозг. Критерием разрушения является полная релаксация (расслабление) всех групп мышц и отсутствие защитных двигательных рефлексов на пощипывание кожи.

Декапитацию производят введением одной бранши ножниц в ротовую полость и отсечением челюсти и переднего отдела мозга. Разрез должен пройти сразу же за глазными буграми. В открывшийся позвоночный канал вводят препаровальную иглу и разрушают спинной мозг.

Для работы необходимо: препаровальный набор инструментов, лоток, салфетки, операционный столик, раствор Рингера, лягушка

Ход работы. Обездвиженной лягушке перерезать позвоночник с окружающими его тканями на 1-1,5 см выше копчика (рис.3).В руке должны остаться задние лапки с тазовой костью и небольшим отделом позвоночного столба. Захватив край кожи пинцетом, снять кожу с лапок. Удалить внутренности. Получают препарат задних лапок лягушки. Вырезать копчик (уростиль). Для этого, держа препарат так, чтобы лапки висели вниз под прямым углом к позвоночнику, вырезают копчиковую кость, которая при таком положении препарата выдается кверху. Перевернуть препарат на

Рис.3. Приготовление нервно-мышечного препарата икроножной мышцв и седалищного

нерва и изолированной икроножной мышцы.

вентральную поверхность и разрезать позвоночник и лонное сращение на две половины (не повредить нервные стволы крестцового сплетения) с тем. Чтобы отделить лапки друг от друга. Получают препараты двух задних лапок.

Следующим этапом является препаровка икроножной мышцы и седалищного нерва. Под ахиллово сухожилие икроножной мышцы подвести лигатуру и перевязать. Затем дистальнее этого места перерезать. Подняв за лигатуру мышцу, отпрепаровывают ее от окружающих тканей. Перерезать берцовую кость ниже коленного сустава, а бедренную – выше его.

Для препаровки седалищного нерва перевернуть препарат дорсальной поверхностью кверху. Стеклянным крючком отодвинуть кверху двуглавую мышцу, а книзу – полуперепончатую. После разрыва фасций между ними обнажается борозда, в которой проходит седалищный нерв. С помощью стеклянных крючков препарируют нерв на всем протяжении до коленного сустава и до позвоночника, оставляя кусочек позвоночника в соединении с нервом. Получают нервно-мышечный препарат.

Следует помнить, что при небрежном приготовлении препарата (прикосновение к нерву руками или металлическим предметом, натяжение, подсыхание, механическое повреждение) он быстро теряет активность Необходимо часто увлажнять препарат раствором Рингера.

Рекомендации к оформлению работы. Зарисовать основные этапы приготовления нервно-мышечного препарата лягушки.

Дата добавления: 2018-02-28 ; просмотров: 1057 ;

Цель работы. Освоить методику приготовления нервно-мышечного препарата лягушки

Лягушка – традиционный объект физиологических исследований. Международные правила защиты животных предусматривают эксперименты на них с учебной и исследовательской целью, категорически запрещая при этом всякую вивисекцию, т. е. операции на живых, не наркоти­зированных или на необездвиженных и необезболенных объектах. Все опыты на лягушках проводят после наркотизации (эфир) и после­дующего разрушения спинного мозга, в котором проходят про­водящие болевые пути.

Классическим объектом исследования яв­ляется нервно-мышечный препарат, на котором великие физио­логи — Н. Маттеучи, Л. Гальвани, И.М. Сеченов, Н.И. Введен­ский и др. исследовали основные закономерности функционирова­ния живого организма.

Оборудование:препаровальный набор, раствор Рингера для холод­нокровны животных, марля, эфир. Объект исследования - лягушка.

1. Обездвижьте лягушку. Для этого оберните марлей наркотизиро­ванную эфиром лягушку так, чтобы лапки ее были прижаты к ту­ловищу, а голова оставалась свободной.

Рис. 8.Обездвиживание лягушки (а, б, в).

Большим пальцем накло­ните вперед голову лягушки и найдите углубление, соответствую­щее атланто-окципитальному отверстию, по центру кзади от затылочной кости. Сразу за глазными буграми верти­кально введите в субокципитальное отверстие конец препаро­вальной иглы на глубину 1—2 мм, поверните ее параллельно цен­тральному каналу, введите в него и продвиньте до крестцово-копчикового соединения, круговыми движениями разрушая спинной мозг. Критерием разрушения является полная релаксация (рас­слабление) всех групп мышц лягушки и отсутствие защитных дви­гательных рефлексов на пощипывание кожи и потягивание за лапку. Извлеките иглу из центрального канала и, повернув ее на 180 °, разрушьте головной мозг.

2. Приготовьте нервно-мышечный препарат. Возьмите лягушку за задние лапки, поверните вниз брюшком и, отступив на 1,5 см выше от копчика, перережьте позвоночный столб с окружающими тканями. В руке должны остаться задние лапки с тазовой костью и небольшим отделом позвоночного столба. Захватив край кожи пинцетом, сни­мите ее с лапок. Подведите браншу ножниц под пояснично-крестцовое сочленение и отделите одну лапку ниже так, чтобы со­членение осталось соединенным с фрагментом позвоночного столба. Расположите препарат задней поверхностью вверх. Раз­двинув стеклянным крючком двуглавую и полуперепончатую мышцы, найдите на бедре седалищный нерв. Приподнимите его и на всем протяжении осторожно отделите от окружающих тка­ней. Бедренную кость и мышцы рассеките в двух местах: ниже та­зобедренного и выше коленного суставов. Затем выделите икро­ножную мышцу: отпрепарируйте ее, отрежьте сухожилие от пя­точной кости, а ниже коленного сустава перережьте кости и все мышцы голени. Пяточное сухожилие перевяжите ниткой. В ре­зультате получится нервно-мышечный препарат, который является универсальным для исследования функций скелетных мышц и нервов.

Следует помнить, что при небрежном приготовлении препарата (прикосновение к нерву руками или металлическими предметами, натяжение, подсыхание, механическое повреждение) препарат бы­стро теряет возбудимость. Поэтому во время проведения опыта не­обходимо часто увлажнять нерв и мышцу раствором Рингера.

Рис. 9. Приготовление нервно-мышечного препарата лягушки

Оформление протокола. Зарисуйте основные этапы приготовления нервно-мышечного препарата лягушки.

Опыты Гальвани и Маттеучи

Рис. 10.Опыт Маттеучи

Оборудование и реактивы:стимулятор СИФ-5, набор препаровальных инструментов, стеклянный крючок, стеклянная пластинка, держатели, биметаллический пинцет, 0,65% раствор NaCl. Опыт проводят на двух лягушках

ХОД РАБОТЫ

Первый опыт Гальвани

1. Возьмите нервно-мышечный препарат и набросьте нерв на одну браншу пинцета (биметаллического), а другой браншей касайтесь икроножной мышцы.

Второй опыт Гальвани

2. Ножницами на икроножной мышце сделайте надрез, ближе к коленному суставу. Положите препарат на стеклянную пластинку и на поврежденный участок мышцы стеклянными крючками набросьте нерв так, чтобы его средняя часть касалась поврежденной поверхности мышцы.

Опыт Маттеучи

Оформление протокола

1. Опишите полученные результаты.

2. Сделайте выводы.

ВЫВОД:

Опыты Гальвани.При набрасывании нерва на поврежденный участок икроножной мышцы лягушки (нерв контактировал одновременно и с неповрежденным участком) наблюдалось сокращение икроножной мышцы. Это сокращение вызвано токами покоя (потенциалом покоя), возникающим между поврежденным (заряженным отрицательно) и неповрежденным (заряженным положительно) участками икроножной мышцы лягушки.

ВЫВОД:

Опыт Маттеучи.При набрасывании седалищного нерва на электроды стимулятора и подачи прерывистого электрического импульса, наблюдается тетаническое сокращение реоскопической лапки, которое распространяется на второй препарат через нерв, наброшенный на икроножную мышцу первого препарата.

Контрольные вопросы для самостоятельной подготовки

1. Понятие о возбудимости.

2. Изменение возбудимости в процессе возбуждения.

3. Биоэлектрические явления и история их открытия

а) опыты Гальвани;

в) опыт Маттеучи.

Лабораторная работа № 2.4. Одиночное и тетаническое сокращение

Цель работы. Определение порога раздражения мышцы. Получение кривой одиночного сокращения мышцы, а также зубчатого и гладкого тетануса

Оборудование:кимограф, вертикальный миограф, универсальный штатив, электронный стимулятор, набор препаровальных инструментов, раствор Рингера для холоднокровных животных. Объект исследования — нервно-мышечный препарат (икроножная мышца — седалищный нерв лягушки).

1. Соберите установку для работы с нервно-мышечным препаратом лягушки (рис.11).

Рис. 11.Установка для работы с нервно-мышечным препаратом лягушки.

1— стимулятор УЭС-1; 2 — универсальный штатив; 3 — вертикальный миограф; 4 — мышца лягушки, фиксированная за бедренную кость; 5 — миографический рычажок; 6 — кимограф; 7 — барабан кимографа; 8 — сто­лик-ванночка для размещения нерва с сегментом спинного мозга.

2. Раздражение мышцы прямым и непрямым способами.Приготовленный нервно-мышечный препарат зафиксируйте в вертикальном положении за бедренную кость в штативе. К нижнему концу мышцы прикрепить за длинное плечо рычажок миографа – мышцу расположить над рычагом.

Седалищный нерв расположите горизонтально так, чтобы он контактировал с раздражающими электродами, на­ложите на него тонкий слой ваты, обильно смоченный раствором Рингера. Включите стимулятор. Ручку плавной регулировки силы тока установите в положение "О", а переключатель частоты — в положение "1". Ключ поставьте в положение "Нерв" и, медленно вращая ручку регулировки силы тока, найдите его минимальную силу (порог раздражения), вызывающую минимальное сокращение мышцы. Подведите к ленте кимографа рычажок с писчиком, за­полненный чернилами, и запишите мышечное сокращение при непрямом раздражении мышцы. Затем поставьте ключ в положе­ние "Мышца" и аналогичным способом определите порог возбу­ждения мышцы при ее прямом раздражении. Запись производите на ленте остановленного кимографа, поворачивая барабан рукой после каждой стимуляции.

3. Получение записи одиночного сокращения мышцы.Найти среднюю силу индукционного тока (частота раздражения не должна превышать 1 Гц, длительность 0,5 мс), вызывающего сокращение мышцы (раздражать непосредственно мышцу редкими импульсами – 3 раза в с). Привести писчик в соприкосновение с барабаном кимографа, пустить барабан в ход и быстро замкнув и разомкнув ключ, записать 3-5 сокращений мышцы. Обратить внимание, какой вид имеет кривая одиночного сокращения.

4. Получение зубчатого и гладкого тетануса.Сокращения мышцы записывать на вращающемся барабане. Подряд несколько раз раздражать мышцу, быстро замыкая и размыкая ключ рукой, постепенно наращивая частоту раздражения – 5, 10, 15, 20 Гц (увеличить число раздражающих импульсов до 13-15 в с), чтобы каждое последующее раздражение совпадало с моментом, когда мышца только начала расслабляться от предыдущего раздражения (для этого раздражать ее, когда писчик только-только начнет опускаться вниз). Затем еще больше увеличить частоту раздражений мышцы (увеличить число раздражающих импульсов до 20-30 в с). Для этого или еще чаще замыкать и размыкать ключ рукой, или переключить стимулятор на генерирование прерывистой подачи тока с помощью прерывателя. Раздражения должны поступать в мышцу, когда она еще не начала расслабляться от предыдущего раздражения (когда писчик еще стоит наверху и не начал опускаться. Посмотреть какой вид имеют кривые.

5. Получение оптимума и пессимума частоты раздражения.Мышцу закрепите в миографе, нерв положите на раз­дражающие электроды. Электроды соедините со стимулятором (ток сверхпороговый, длительность импульсов — 0,5 мс).

До проведения опыта подберите минимальную частоту раздра­жения нерва, при которой мышца будет сокращаться по типу гладкого тетануса. Подведите писчик миографа к барабану кимо­графа и запишите сокращения мышцы при раздражениях нерва ритмическим током частотой 30 Гц, 40 Гц. Обратите внимание на то, что при увеличении частоты раздражения нерва амплитуда гладкого тетануса увеличивается. При частоте раздражения по­рядка 50 Гц амплитуда тетануса становится наибольшей; это — оптимум.

Увеличьте частоту раздражения нерва до 140 Гц. При этом на­блюдается сокращение мышцы на начало раздражения, за кото­рым следует ее расслабление при продолжающемся раздражении нерва; это — пессимум.

Можно доказать, что состояние пессимума не является след­ствием утомления мышцы (Н.Е. Введенский). Попробуйте во вре­мя пессимального расслабления мышцы (частота раздражения нерва 140 Гц) быстро переключить стимулятор на более низкую частоту (50 Гц). После переключения мышца немедленно из со­стояния пессимума перейдет к оптимуму или к одному из видов тетануса — зубчатому или гладкому в зависимости от частоты раз­дражения в данный момент.

Оформление протокола.

1. Зарисовать кривую возбудимости мышцы прямым и непрямым способами.

Рис. 12. Определение возбудимости нерва и мышцы.

Раздражение мышцы: а — непрямое (через нерв); б — прямое (на мышцу). Стрелками обозначены моменты нане­сения раздражения; цифрами — пока­зания шкалы стимулятора, мВ.

2. Зарисовать кривую одиночного сокращения мышцы, а также кривые зубчатого и гладкого тетануса

Рис. 13.Зависимость ха­рактера мышечных сокра­щений икроножной мышцы лягушки от час­тоты раздражения.

1 — одиночные сокращения;

2 — зубчатый тетанус;

3 — гладкий тетанус.

3. Зарисовать схему гладкого тетануса икроножной мышцы, записанного при разной частоте стимуляции нерва. Сделайте вывод о зависимости амплитуды гладкого тетануса от частоты стимуляции нерва. Укажите, при какой частоте возни­кает оптимум и при какой — пессимум.

Рис. 14.Зубчатый и гладкий тетанус, оптимум и пессимум, возникающие в ответ на различную частоту раздражения:

1 — оптимум; 2 — пессимум; 3 — зубчатый тетанус; 4 - одиночные сокращения на возрастающие по силе раздражения

4. Дайте оценку возбудимости нерва и мышцы, сравнив пороги их возбуждения.

5. Сделайте соответствующие выводы:

Контрольные вопросы для самостоятельной подготовки

1. Прямое и непрямое раздражение мышц.

2. Раздражители и их классификация.

3. Порог раздражения.

4. Одиночное сокращение мышцы.

5. Зубчатый и гладкий тетанус.

Опора деревянной одностоечной и способы укрепление угловых опор: Опоры ВЛ - конструкции, предназначен­ные для поддерживания проводов на необходимой высоте над землей, водой.

Общие условия выбора системы дренажа: Система дренажа выбирается в зависимости от характера защищаемого.

Механическое удерживание земляных масс: Механическое удерживание земляных масс на склоне обеспечивают контрфорсными сооружениями различных конструкций.

Цель работы: приготовить нервно-мышечный препарат лягушки.

Оснащение: набор препаровальных инструментов и материалов, раствор Рингера.

Содержание работы. Обездвиживают лягушку. Ножницами перерезают позвоночник примерно посередине туловища (1) и отделяют верхнюю половину тела. Удаляют остатки внутренностей пинце­том и ножницами. Захватив одной рукой через салфетку остаток позвоночника, а другой - край кожи со спины, снимают кожу с обеих лапок (2), получая препарат двух задних лапок лягушки (3). Далее готовят препарат одной лапки. Для этого, держа препарат так, чтобы лапки висели вниз под углом к позвоночнику, ножницами осторожно вырезают копчиковую кость - уростиль, которая при таком положении препарата выдаётся кверху (4).

Рис.1. Приготовление нервно-мышечного препарата лягушки

Затем, стараясь не задеть нервных стволиков крестцового сплетения, про­дольно разрезают по средней линии позвоночник и все другие ткани с тем, чтобы отделить лапки друг от друга. Следующим этапом работы является препаровка икроножной мышцы и седалищного нерва. Подводят под ахиллово сухожилие браншу ножниц, отделяют сухожи­лие по всей длине и подрезают ниже сесамовидной косточки. Захва­тив сухожилие пинцетом, оттягивают мышцу в сторону, разрывая фасции, связывающие её с другими тканями. Для препаровки нерва бедро располагают задней поверхностью вверх. Мышцы разводят и двумя стеклянными крючками отпрепаровывают лежащий в глубине седалищный нерв по всей его длине (5, 6). Приподняв нерв, подрезают ножницами окружающие ткани. Перерезают лапку выше и ниже коленного сустава (7, 8). Получают нервно-мышечный препарат икроножной мышцы и седалищного нерва. До начала работы помещают его в чашку Петри, завернув в вату, смоченную раствором Рингера. На конце нерва рекомендуется сохранять небольшой участок позвоночника, так как, во-первых, отсечение нерва от позвоночника наносит дополнительную травму, а во-вторых, за него удобно брать препарат пинцетом, помещая нерв на электроды. Для приготовления препарата изолированной мышцы нерв отсекают полностью у самой мышцы (9).

Оформление протокола. Зарисуйте приготовление нервно-мышечного препарата лягушки (рис.1).

Ситуационные задачи для определения конечного уровня знаний студентов:

Будет ли нарушаться барьерная функция клеточных мембран при увеличении в её бислое лизоформ фосфолипидов? Как будут вести себя в водной среде молекулы фосфолипидов?

Чем определяется гидрофобность и гидрофильность липидов, входящих в состав клеточных мембран?

Какие вещества хорошо растворяются в билипидном слое плазматических мембран? Способны ли липиды совершать движения в билипидном слое плазматических мембран?

Влияет ли на липидный состав мембран характер питания человека? Оказывают ли витамины своё влияние на липиды бислоя?

Какие факторы влияют на скорость облегчённой диффузии? Какие факторы отличают простую диффузию веществ от облегчённой?

Концентрация ионов калия внутри клеток в 10 раз выше, чем вне её. Мембрана клеток непроницаема для ионов хлора. Чему равно предельное значение потенциала покоя в этой клетке? Почему в действительности потенциал покоя клетки не достигает этого значения?

Под влиянием гуморальных факторов проницаемость мембраны клетки для ионов натрия увеличилась. Как это скажется на потенциале покоя клетки и почему?

В тканевой жидкости, окружающей клетки, повысилась концентрация ионов калия. Как это скажется на значении потенциала покоя в этой клетке и почему?

Динитрофенол, действуя на клетки, блокирует метаболические процессы, поставляющие энергию. Как и почему изменится значение потенциала покоя клетки при действии на неё динитрофенола?

Миелиновая оболочка нервного волокна повреждена на участке 0,7мм. Будет ли проводится возбуждение по волокну, если известно, что расстояние между перехватами Ранвье составляет 0,9мм?

Какой из законов проведения нервного импульса может нарушиться, если значительно уменьшится сопротивление мембран нервных волокон, входящих в состав того же нерва и почему?

Развитие оптимума и пессимума частоты и силы раздражения связаны как с функциональными особенностями самой клетки, так и с параметрами воздействия на неё. Ответьте, когда возникает оптимум частоты и силы, пессимум частоты? С чем связано явление пессимума?

Проводниковая блокада, широко применяемая в различных отраслях медицины (стоматология, неврология, хирургия), основана на взаимодействии анестезирующего вещества с мембраной нервных волокон. Причиной прекращения проведения возбуждения и последующего обезболивающего эффекта является изменение функционального состояния мембраны при взаимодействии её с анестетиком. С чем в основном связан обезболивающий эффект действия лидокаина при проводниковой анестезии? Что лежит в основе блокады проведения возбуждения по нерву?